Médiathèque
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L’ADN néosynthétisé est marqué par un pulse de BrdU suivi d’une chasse thymidine. Lors du séquençage nanopore, les molécules sont déroulées en ADN simple brin et transloquées au travers de pores protéiques insérés dans une membrane soumise à un champ électrique. Les modifications du courant lors de ...
L’ADN néosynthétisé est marqué par un analogue de la thymidine couplé à un fluorochrome (AF647-dUTP, en rouge). Après extraction, l’ADN est digéré par une nickase, c’est-à-dire par une enzyme de restriction coupant un seul des deux brins. Puis, des nucléotides fluorescents sont incorporés au niveau ...
(A) Schéma du protocole expérimental de double marquage réplicatif de cellules en culture et exemple de signal théorique obtenu. L’ADN néosynthétisé est marqué successivement par un pulse d’IdU (en vert) puis un pulse de CldU (en rouge), dont l’incorporation est stoppée par l’ajout de thymidine (« c...
(A, B) Visualisation par autoradiographie du chromosome circulaire d’E. coli marqué à la thymidine tritiée. (A) Autoradiogramme original publié par John Cairns en 1963. La barre d’échelle correspond à 100 µm ; les croix signalent la position d’une cassure du chromosome. (B) Schéma interprétatif. Les...
L’ADN-T est remplacé par un transgène, porteur d’un gène d’intérêt (GI) associé à un gène de sélection (GS). Du fait des techniques utilisées, certaines séquences bactériennes sont encore présentes dans cette construction simple ; elles sont notées sur la figure (les constructions plus récentes ne p...
