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Une taille précise peut être obtenue soit par la modification de la durée des phases du cycle cellulaire, soit par la modification du taux de croissance au cours du cycle cellulaire.

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Modèle sizer

D’après le modèle sizer, les cellules se divisent une fois qu’elles mesurent une certaine longueur (symbolisée par la règle). Dans le modèle adder, les cellules se divisent une fois qu’elles se sont agrandies d’un volume fixé (en bleu), indépendant de leur taille initiale. Les comportements respecti...

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Deux modèles de contrôle de la division cellulaire

A) La différence de pression (osmotique) à travers la membrane va influencer la pression hydrostatique de la cellule (Pcellule) par les entrées et sorties d'eau. Cette dernière va impacter la tension de la membrane mais également celle du cortex d'actomyosine. (B) Par exemple, une forte différence d...

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Forces s'exerçant sur la membrane plasmique

Pour s'adapter à un changement de pression osmotique environnante, la cellule peut importer de l'eau grâce aux aquaporines. Elle peut aussi minimiser un différentiel de pression osmotique sans changer son volume en faisant entrer et sortir des ions grâce à des pompes ioniques.

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Ajustement de l'osmolarité intracellulaire par flux d'ions et d'eau
Différentes méthodes d'invalidation de gènes

Différents résultats sont obtenus par la recombinaison homologue en fonction de la construction réalisée au départ : knock-out (invalidation du gène), knock-in (remplacement par un autre gène), ou mutagenèse dirigée (remplacement par un allèle muté).

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Différentes méthodes d'invalidation de gènes
Exemple d’invalidations multiples : ensemble des paralogues HOX8 (HOXB8, C8 et D8)

Un exemple de souris « triple KO » obtenue par invalidations des trois gènes HOX8 (B, C, D) : zoom sur le haut du thorax montrant la fusion partielle des deux premières côtes. Ce phénotype est grandement amplifié chez les triples KO par rapport aux souris chez lesquelles le seul gène HOXB8 a été inv...

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Exemple d’invalidations multiples : ensemble des paralogues HOX8 (HOXB8, C8 et D8) ...
Exemple d’invalidation du gène HOXC8

Chez les souris HOXC8 -/- , dans près de 9 cas sur 10 on observe un changement d’identité de la première vertèbre lombaire (L1) vers une identité de vertèbre thoracique (T13). Ceci se manifeste par une paire de côtes flottantes supplémentaires (« côtes 14 ») notées par une étoile * sur cette photo.

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Exemple d’invalidation du gène HOXC8
Exemple d’invalidation de gène : HOXB8 (vue de profil)

Vue de côté (détail).
En plus de la modification observable au niveau des cotes T1 et T2, noter, chez la souris KO, l’absence d’une excroissance typique de la vertèbre T2 (petit cadre à gauche).

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Exemple d’invalidation de gène : HOXB8 (vue de profil)
Exemple d’invalidation de gène : HOXB8 (vue de face)

Vue de face des cages thoraciques d’une jeune souris sauvage (+/+) et d’une souris KO pour HOXB8 (-/-).

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Exemple d’invalidation de gène : HOXB8 (vue de face)
Exemple de HOXB8 chez la souris

Expression du gène lacZ (en bleu foncé) en lieu et place de HOXB8 chez un jeune embryon de souris. On détecte une expression dans le tube neural et les somites, avec une frontière antérieure au niveau de la 7e pré-vertèbre de l’embryon.
 

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Exemple de HOXB8 chez la souris
Principe de l’invalidation d’un gène

L’invalidation d’un gène est le remplacement de ce gène, dans le génome de l’organisme, par une version modifiée, inactive, de ce gène. Dans cet exemple, le gène A est remplacé par un autre gène : lacZ. Ce remplacement est permis par la présence de séquences identiques entre la construction et le gé...

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Principe de l’invalidation d’un gène
Obtention de souris KO pour un gène

Le croisement des hétérozygotes obtenus précédemment, entre eux, permet l’obtention (dans la proportion de 1/4 de la descendance) d’individus homozygotes : ce sont les individus KO, chez qui le gène a été invalidé.

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Obtention de souris KO pour un gène
Obtention de souris hétérozygotes

Le croisement d’une souris mosaïque (dont les cellules sexuelles dérivent des cellules ES recombinées) avec une souris sauvage (ne possédant pas cette mutation) permet d’obtenir, pour 50 % de la descendance, des souris hétérozygotes pour cette mutation.

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Obtention de souris hétérozygotes
Des cellules ES recombinées aux souris mosaïques

L’injection de cellules ES recombinées dans de très jeunes embryons de souris (ces cellules s’intègrent à l’embryon) permet l’obtention d’individus mosaïques, dérivant pour partie de cellules non modifiées, et pour partie de cellules recombinées.

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Des cellules ES recombinées aux souris mosaïques
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