Principe moléculaire de la réécriture de base (également appelée édition de base ; base editing en anglais)
Après recrutement de la Cas9 fusion à la séquence cible, l’enzyme (ici, la cytosine désaminase) modifie chimiquement une base, conduisant à la modification voulue. Réalisé à l'aide de Biorender.
Détail du complexe Cas9/ARNg fixé sur sa séquence cible d’ADN. Après coupure double brin trois nucléotides en amont du motif PAM, deux mécanismes sont possibles. La réparation non homologue (NHEJ pour Non Homologous End Joining) induit des mutations aléatoires de type insertion ou délétion (indels)....
RT : transcriptase inverse (reverse transcriptase). PBS : site de liaison à l’amorce (primer binding site).
Étape 1 : Grâce à sa séquence cible, l’ARNpeg s’hybride à la séquence d’intérêt sur la molécule d’ADN ciblée. La nCas9 réalise alors une coupe simple brin.
Étape 2 : Le site de liaison à l’amo...
Dans l’exemple présenté, un virus adéno-associé recombinant infectant spécifiquement les photorécepteurs est injecté au sein de la rétine. Ce virus contient une séquence codant deux éléments majeurs : la séquence codant la nucléase Cas9 (vert foncé) et la séquence d’un ARN guide (vert clair) spécial...
La localisation de quelques mutations (représentées en jaune) dans le domaine en tête de fourche de la protéine FOXP3 (représentée en vert). L’ADN est représenté en bleu.
Dans le cas de la drépanocytose, l’édition génomique est faite in vitro après prélèvement des cellules souches hématopoïétiques (précurseurs des globules rouges) du patient. Réalisé à l’aide de Biorender.
A. Les souris sont déposées dans une bassine d’eau contenant au centre une plateforme.
B et C. Le temps passé dans l’eau et la distance parcourue avant de trouver la plateforme sont mesurées. Les souris mutantes rd10 ont été injectées avec une solution saline, un système de réécriture de base conten...
