A. Transfert de protéines (Western blot) dirigé contre la protéine PDE6B. L’actine sert de témoin de charge. Les souris mutantes rd10 ont été injectées avec une solution saline, un système de réécriture de base contenant un ARN guide non spécifique ou un système de réécriture de base contenant un ARN guide spécifique de la mutation du gène PDE6B portée par les souris rd10.
B. Des coupes de rétine sont colorées avec un intercalant de l’ADN, le DAPI, révélant ainsi les noyaux (bleu). PDE6B et les protéines du système de réécriture de base sont révélées par des anticorps spécifiques couplés respectivement à une molécule fluorescente rouge ou verte. OS : couche des segments externes des photorécepteurs ; ONL : outer nuclear layer, couche nucléaire externe, contenant les noyaux des photorécepteurs ; INL : inner nuclear layer, couche nucléaire interne, contenant les noyaux des cellules bipolaires notamment.
Expression de la protéine PDE6B dans les rétines de souris sauvages et de souris mutantes rd10 ayant reçu différents traitements
Expression de la protéine PDE6B dans les rétines de souris sauvages et de souris mutantes rd10 ayant reçu différents traitements
Autres médias
A. Histologie en coloration hématoxyline éosine des parties nasale et temporale chez une souris mutante rd10 injectée avec le système de réécriture de base fonctionnel. La couche nucléaire externe (ONL) est repérée par une tête de flèche. INL : inner nuclear layer, couche nucléaire interne, contenan...
Dans l’exemple présenté, un virus adéno-associé recombinant infectant spécifiquement les photorécepteurs est injecté au sein de la rétine. Ce virus contient une séquence codant deux éléments majeurs : la séquence codant la nucléase Cas9 (vert foncé) et la séquence d’un ARN guide (vert clair) spécial...
A. Les souris sont déposées dans une bassine d’eau contenant au centre une plateforme. B et C. Le temps passé dans l’eau et la distance parcourue avant de trouver la plateforme sont mesurées. Les souris mutantes rd10 ont été injectées avec une solution saline, un système de réécriture de base conten...
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Après recrutement de la Cas9 fusion à la séquence cible, l’enzyme (ici, la cytosine désaminase) modifie chimiquement une base, conduisant à la modification voulue. Réalisé à l'aide de Biorender.